آنزیم DNA پلیمراز Pfu

Pfu DNA Polymerase آنزیمی است که در باکتری بسیار گرمادوست Pyrococcus furiosus یافت می شود. این آنزیم مقاوم در برابر حرارت به خانواده B آنزیمهای DNA polymerase تعلق دارد. وزن مولکولی آن 90 کیلو دالتون می باشد.

این آنزیم پروتئینی نوترکیب با درجه خلوص بالا می باشد که پلیمریزاسیون نوکلئوتیدها به DNA دوبلکس را در جهت ´3 <´5 کاتالیز می کند. در نتیجه منجر به تولید محصولات PCR با انتهای صاف بدون اورهنگ´3-dA می شود. 

Pfu بر خلاف آنزیم Taq دارای فعالیت تصحیح کنندگی´3 >´5 می باشد. میزان خطای آنزیم پی اف یو پلیمراز 1 در 1.3 میلیون جفت باز به ازای تشکیل قطعه 1 کیلو باز در PCR می باشد. در حالیکه میزان خطای آنزیم تک پلیمراز 1 در 9000 نوکلئوتید است.

همچنین پایداری آنزیم Pfu پلیمراز در برابر حرارت بیشتر از آنزیم Taq پلیمراز است. این آنزیم سرعت کمتری نسبت به آنزیم Taq دارد. در هر چرخه PCR به ازای هر 1Kb در دمای 72 درجه سانتیگراد به 2 دقیقه زمان نیاز دارد.

آنزیم پی اف یو برای PCR و واکنش گسترش پرایمر که به فیدلیتی بالایی نیاز دارد زمانیکه قطعه PCR کوتاهتر از 3Kb باشد، مناسب است.

با توجه به فعالیت تصحیح کنندگی´3 به´5 آنزیم  Pfu DNA Polymerase میزان فیدلیتی PCR آن بیش از 10 برابر بیشتر از آنزیم Taq  می باشد.