آنزیم DNA پلیمراز هات استارت Taq – شیمیایی

آنزیم DNA پلیمراز هات استارت Taq شیمیایی پارس توس

معرفی محصول:

آنزیم DNA پلیمراز هات استارت Taq – شیمیایی محصول شرکت پارس توس یک آنزیم PCR پیشرفته با مکانیسم فعال‌سازی حرارتی و کنترل دقیق آغاز واکنش است. این آنزیم از خانواده Hot Start Taq بوده و با استفاده از فناوری اصلاح شیمیایی، فعالیت خود را در دمای اتاق به‌طور کامل مهار می‌کند. به این ترتیب، تکثیر غیر اختصاصی DNA در مراحل آماده‌سازی واکنش به حداقل می‌رسد و دقت فرآیند PCR به شکل چشمگیری افزایش پیدا می‌کند.

در این فرمولاسیون، یک مهارکننده شیمیایی به صورت برگشت‌پذیر به آنزیم متصل می‌شود که تا زمانی که دما به بیش از ۶۰ درجه سانتی‌گراد نرسد، مانع فعالیت آن است. این عملکرد باعث می‌شود که Hot Start Taq تنها در مرحله دناتوراسیون اولیه PCR فعال گردد و تکثیر با دقت و سرعت بالا انجام شود.

شرکت پارس توس این آنزیم را هم به صورت معمولی و هم در نسخه Hot Start Taq با ROX برای استفاده در دستگاه‌های Real-Time PCR عرضه می‌کند. نسخه ROX، رنگ مرجع فلورسانس را در ترکیب خود دارد که به تثبیت و پایش سیگنال‌ها در طول واکنش کمک می‌کند.

مکانیسم عملکرد:

آنزیم Hot Start Taq اصلاح شده شیمیایی در دمای محیط غیرفعال است و برای فعال شدن به یک مرحله انکوباسیون ۹۵ درجه سانتی‌گراد نیاز دارد. پس از فعال‌سازی، این آنزیم قادر به کاتالیز واکنش‌های پلیمریزاسیون DNA در جهت ‘۵→’۳ می‌باشد و فاقد فعالیت اگزونوکلئازی ‘۳→’۵ تصحیح‌کننده است.

این مکانیسم به ویژه در واکنش‌هایی که از پرایمرهای حساس و مارکرهای فلورسانس مانند ROX استفاده می‌کنند، اهمیت دارد زیرا از تشکیل پرایمر-دایمرها جلوگیری کرده و سیگنال فلورسانس را شفاف‌تر و دقیق‌تر می‌سازد.

مزایای استفاده از Hot Start Taq:

1. افزایش دقت: جلوگیری از گسترش غیر اختصاصی ژن‌ها یا پرایمر-دایمرها.
2. کارایی بالا: مناسب برای الگوهای با پیچیدگی زیاد یا غلظت پایین DNA.
3. سازگاری گسترده: قابل استفاده هم در PCR معمولی و هم Real-Time PCR (نسخه همراه ROX).
4. پایداری در ذخیره‌سازی: فرمولاسیون بهینه شده برای دوام طولانی در دمای -۲۰ درجه سانتی‌گراد.
5. بهینه برای قطعات کوتاه: عملکرد بسیار خوب برای آمپلیکون‌های کمتر از ۵۰۰ جفت باز.

کاربردها:

• تحقیقات ژنتیک و بیولوژی مولکولی
• کلونینگ و بیان ژن
• شناسایی جهش‌ها با PCR اختصاصی آلل
• تحقیقات تشخیصی (نسخه همراه ROX برای qPCR)
• سنجش بیان ژن

اجزای کیت:

نسخه استاندارد Hot Start Taq شرکت پارس توس شامل:

• cHot Start Taq DNA Polymerase (۵U/μl)
• MgCl₂ Solution (۲۵ mM)
• 10x Buffer MgCl₂-free

نسخه اختصاصی Hot Start Taq با ROX اضافاً حاوی رنگ مرجع ROX برای استفاده مستقیم در دستگاه‌های Real-Time PCR است.

نکات عملکردی و فنی:

• برای فعال‌سازی کامل، انکوباسیون اولیه در ۹۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۵ تا ۱۰ دقیقه الزامی است.
• مناسب برای واکنش‌هایی با پرایمرهای با نقطه ذوب بالا (Tm بالا).
• در نسخه همراه ROX، نیازی به افزودن رنگ مرجع به‌صورت جداگانه وجود ندارد.
• برای قطعات بالاتر از ۵۰۰bp نیز قابلیت استفاده دارد، اما بهترین عملکرد در قطعات کوتاه مشاهده می‌شود.

ویژگی‌های ساختاری:

• آنزیم Hot Start Taq محصول پارس توس به روش مهار شیمیایی پایدار شده است، که امکان حمل و نقل و نگهداری آسان‌تر را نسبت به روش‌های آنتی‌بادی‌محور فراهم می‌کند.
• فرمولاسیون بافر اختصاصی باعث افزایش فرآیندپذیری آنزیم حتی در حضور GC زیاد یا الگوهای ثانویه پیچیده می‌شود.
• نسخه Hot Start Taq با ROX به گونه‌ای طراحی شده که بدون تغییر در پروتکل، به واکنش‌های qPCR اضافه شود.

شرایط نگهداری:

برای حفظ کیفیت و پایداری، آنزیم Hot Start Taq باید در دمای -۲۰ درجه سانتی‌گراد نگهداری شود. از انجام چرخه‌های مکرر انجماد/ذوب خودداری کنید.

بسته‌بندی و ارائه:

پارس توس آنزیم Hot Start Taq را در بسته‌بندی‌های متنوع (بر اساس تعداد واحد آنزیم) و با یا بدون ROX عرضه می‌کند تا متناسب با نیاز آزمایشگاه‌ها باشد. در هر بسته، دستورالعمل کامل استفاده همراه با توضیحات فنی و نکات ذخیره‌سازی ارائه شده است.

جمع‌بندی:

آنزیم DNA پلیمراز هات استارت Taq – شیمیایی محصول پارس توس انتخابی ایده‌آل برای پژوهشگرانی است که به دنبال حداکثر دقت و بازدهی در واکنش PCR هستند. فناوری مهار شیمیایی و قابلیت ارائه در قالب نسخه Hot Start Taq با ROX باعث شده این محصول به یک گزینه همه‌کاره و مقرون به‌صرفه برای علـوم زیستی و تحقیقات ژنتیکی تبدیل شود.

چه در PCR معمولی و چه در Real-Time PCR، این آنزیم نتایج پایدار، دقیق، و قابل اعتماد ارائه می‌دهد و به دلیل تولید داخلی با استانداردهای بین‌المللی، جایگزین مناسبی برای محصولات وارداتی است.

فایل های مرتبط با آنزیم DNA پلیمراز هات استارت Taq شیمیایی: