کیت استخراج RNA توتال

کیت استخراج RNA توتال پارس توس

معرفی محصول:

Total RNA Extraction Kit محصول شرکت پارس توس ابزاری قدرتمند، سریع و قابل اعتماد برای استخراج RNA توتال از انواع نمونه‌های بیولوژیکی است. این کیت بر پایه روش ستون سیلیکا طراحی شده که یکی از پرکاربردترین و مطمئن‌ترین شیوه‌های استخراج اسیدهای نوکلئیک در زیست‌شناسی مولکولی به شمار می‌رود. به کمک این کیت می‌توان RNA را از بافت‌های حیوانی، خون، کشت سلولی و حتی باکتری‌های گرم منفی با کیفیت بسیار بالا استخراج کرد؛ به‌گونه‌ای که برای کاربردهای حساس مانند RT-PCR، Northern Blot و توالی‌یابی نسل جدید (NGS) مناسب باشد.

Total RNA Extraction Kit چیست و چه کاربردی دارد؟

Total RNA Extraction Kit یک ابزار پیشرفته و دقیق در حوزه زیست‌شناسی مولکولی است که به طور اختصاصی برای استخراج RNA توتال از انواع نمونه‌های زیستی طراحی شده است. محققان و تکنسین‌های آزمایشگاهی که در حوزه‌هایی مانند بیوتکنولوژی، ژنتیک، بیولوژی سلولی و تحقیقات پزشکی فعالیت دارند، اغلب به RNA خالص و با کیفیت بالا نیاز دارند تا بتوانند آزمایش‌های حساس و دقیق نظیر RT-PCR، مطالعات بیان ژن، RNA-Seq و آنالیزهای ترنسکریپتوم را انجام دهند. این محصول شرکت پارس توس با بهره‌گیری از فناوری ستون سیلیکا و بافرهای بهینه‌سازی‌شده، فرآیند جداسازی RNA را ساده، سریع و ایمن کرده است.

در فرآیند کار با Total RNA Extraction Kit، نمونه زیستی ابتدا با یک بافر لیزکننده فنولیک با خاصیت دناتوره‌کنندگی بالا ترکیب می‌شود. این بافر دو کار اساسی انجام می‌دهد: نخست، لیز کامل سلول‌ها یا بافت‌ها با تخریب غشاهای سلولی و هسته‌ای؛ دوم، غیرفعال‌سازی فوری آنزیم‌های RNase که به طور طبیعی در سلول وجود دارند و می‌توانند RNA را تجزیه کنند. نتیجه این واکنش اولیه، آزاد شدن مولکول‌های RNA در شرایطی است که تخریب آن‌ها به حداقل رسیده است.

پس از مرحله لیز، مخلوط حاصل تحت سانتریفیوژ قرار گرفته و فاز آبی در تماس با ستون سیلیکا قرار می‌گیرد. این ستون‌ها به گونه‌ای طراحی شده‌اند که فقط مولکول‌های RNA را به دام می‌اندازند و بقیه مولکول‌ها نظیر DNA، پروتئین‌ها و لیپیدها شسته و حذف می‌شوند. این ویژگی باعث می‌شود که RNA نهایی به دست آمده دارای بالاترین شاخص خلوص (نسبت جذب A260/A280 بیش از 1.8) باشد و برای کاربردهای مولکولی حساس آماده گردد.

آنچه Total RNA Extraction Kit را نسبت به روش‌های سنتی مانند فنول-کلروفرم متمایز می‌کند، سرعت، امنیت و بازدهی بسیار بالای آن است. در حالی که روش‌های قدیمی چندین ساعت زمان می‌بردند و با خطرات ناشی از استفاده از حلال‌های آلی همراه بودند، این کیت قادر است ظرف کمتر از ۳۰ دقیقه RNA توتال را با کیفیت عالی استخراج کند، بدون نیاز به مراحل رسوب‌دهی طولانی و استفاده گسترده از مواد سمی.

از منظر کاربردی، استفاده از Total RNA Extraction Kit محدود به یک حوزه تحقیقات پایه نیست. این محصول در پروژه‌های تشخیصی، بررسی اثر دارو بر بیان ژن، آنالیز پاسخ ایمنی، تحقیقات سرطان، زیست‌فناوری کشاورزی و حتی مطالعات میکروبیوم کاربرد دارد. قابلیت استخراج RNA از منابع متنوع مانند بافت‌های حیوانی، خون، کشت سلولی و حتی باکتری‌های گرم منفی، آن را به یک ابزار همه‌فن‌حریف برای انواع آزمایشگاه‌ها تبدیل کرده است.

انواع نمونه‌های قابل پردازش با Total RNA Extraction Kit:

این کیت انعطاف‌پذیری بالایی دارد و می‌تواند بسیاری از انواع نمونه‌های زیستی را مورد پردازش قرار دهد:

• بافت‌های حیوانی مانند کبد، طحال، مغز، عضله و کلیه
• کشت سلول‌های چسبنده و شناور
• نمونه‌های خون تازه یا خون ذخیره شده در EDTA
• باکتری‌های گرم منفی مانند E. coli (با پیش‌سانتریفیوژ و کار روی پلت سلولی)

مقدار نمونه موردنیاز بسته به نوع بافت متفاوت است. به عنوان مثال:

• ۲۰–۴۰ میلی‌گرم بافت (حـدود ۲۰ میلی‌گرم برای کبد یا طحال کافی است)
• ۱۵۰ میکرولیتر خون کامل
• حداقل (1~2 × 10⁶) سلول کشت‌شده
• ۳ تا ۵ میلی‌لیتر محیط کشت باکتریایی سانتریفیوژ شده

ویژگی‌های کلیدی مولکولی و فنی کیت استخراج RNA توتال:

• استفاده از فناوری ستون سیلیکا و فیلتراسیون پیشرفته
• حذف مؤثر پروتئین‌ها، DNA و سایر آلاینده‌ها
• امکان پردازش همزمان چندین نمونه با دقت و یکنواختی بالا
• زمان انجام کل فرآیند کمتر از ۳۰ دقیقه
• سازگار با انواع کاربردهای پایین‌دستی مانند RT-PCR و RNA-Seq

مقایسه روش ستون سیلیکا با روش‌های قدیمی استخراج RNA:

در گذشته، روش‌های شیمیایی کلاسیکی مانند استخراج فنول-کلروفرم به عنوان استاندارد طلایی برای جداسازی RNA شناخته می‌شدند. این روش‌ها بر پایه استفاده از حلال‌های آلی مانند فنول و کلروفرم بنا شده بودند؛ ترکیباتی که قدرت بالایی در دناتوره کردن پروتئین‌ها و جداسازی اسیدهای نوکلئیک دارند، اما به همان میزان نیز خطرناک، سمی و سرطان‌زا بوده و نیاز به رعایت شدید اقدامات ایمنی داشتند. علاوه بر آن، فرآیندهای رسوب‌دهی با اتانول و شستشوی مکرر، زمان استخراج را به چندین ساعت افزایش می‌داد و احتمال از بین رفتن یا کاهش کیفیت RNA را بالا می‌برد.

یکی از بزرگ‌ترین چالش‌های این روش‌های قدیمی، احتمال آلودگی متقاطع بین فازهای آبی و آلی بود. ورود حتی مقادیر جزئی فنول به نمونه نهایی، می‌توانست کیفیت و بازدهی آزمایش‌های پایین‌دستی مانند RT-PCR و توالی‌یابی را به شدت کاهش دهد. همچنین به دلیل کار با مقادیر زیاد محلول‌های آلی، نیاز به هود شیمیایی و مدیریت پسماند خطرناک، هزینه‌ها و محدودیت‌های عملیاتی افزایش می‌یافت.

در مقابل، Total RNA Extraction Kit شرکت پارس توس با بهره‌گیری از فناوری ستون سیلیکا و محیط‌های کاملاً RNase-Free، جایگزینی مدرن، ایمن و پرکاربرد ارائه می‌دهد. در این روش، مولکول‌های RNA بر اساس برهم‌کنش‌های بارداری و ساختاری به سطح سیلیکا متصل می‌شوند، در حالی که ناخالصی‌ها، DNAهای ژنومی، پروتئین‌ها و مهارکننده‌ها شسته و حذف می‌گردند. این مکانیسم ساده و هوشمند، نیاز به استفاده گسترده از حلال‌های خطرناک را حذف کرده و برای اپراتور و محیط زیست ایمن‌تر است.

از نظر زمان‌بندی، فرآیند استخراج با Total RNA Extraction Kit معمولاً کمتر از ۳۰ دقیقه طول می‌کشد؛ چیزی که در مقایسه با چندین ساعت روش فنول-کلروفرم، یک جهش بزرگ در بهره‌وری محسوب می‌شود. علاوه بر آن، حذف مراحل رسوب‌دهی طولانی با الکل، کاهش هدررفت نمونه و افزایش بازدهی را به‌همراه دارد. RNA حاصل نیز خلوصی بالاتر از 1.8 در نسبت جذب A260/A280 داشته که نشان‌دهنده کیفیت مناسب برای مراحل حساس تحقیقاتی است.

در نهایت، اگرچه روش‌های قدیمی هنوز در برخی آزمایشگاه‌های خاص استفاده می‌شوند، اما برای اغلب کاربردهای تحقیقاتی و تشخیصی، فناوری ستون سیلیکا و کیت‌های مدرن مانند Total RNA Extraction Kit به دلیل سرعت، سهولت، ایمنی و کیفیت برتر، انتخاب اول محققان و متخصصان زیست‌مولکولی در سراسر دنیا به شمار می‌رود.

اجزای موجود در بسته Total RNA Extraction Kit:

• Lysis Buffer (RL) – حاوی عوامل دناتوره‌کننده قوی برای تجزیه سلول
• Wash Buffer (PW) – برای شستشو و حذف پروتئین‌ها و آلاینده‌ها
• RNase-free DEPC Water – برای شستشو و نهایتاً شستشوی RNA خالص
• Spin Columns (رینگ بنفش) – فیلترهای سیلیکا برای اتصال و جداسازی RNA
• Collection Tubes – تیوب‌های جمع‌آوری محلول

مواد موردنیاز که باید جداگانه تهیه کنید:

• کلروفرم خالص
• اتانول ۷۰٪ یا ۹۶٪

نحوه عملکرد Total RNA Extraction Kit:

در این روش، سلول‌ها یا بافت‌ها ابتدا در حضور بافر RL لیز می‌شوند که علاوه بر شکستن غشاها، باعث غیرفعال‌شدن آنزیم‌های RNase نیز می‌گردد. سپس با افزودن کلروفرم و سانتریفیوژ، فاز آبی حاوی RNA از آلاینده‌ها جدا می‌شود. محلول RNA به ستون سیلیکا منتقل می‌شود که به دلیل ویژگی‌های شیمیایی‌اش، فقط RNA را به خود متصل می‌کند. پس از چند مرحله شستشو با بافر PW و اتانول جهت حذف پروتئین و DNA، در نهایت RNA خالص با RNase-free Water شسته و جمع‌آوری می‌گردد.

مزایای استفاده از کیت استخراج RNA توتال پارس توس:

• سرعت بالا – استخراج در کمتر از ۳۰ دقیقه
• کیفیت تضمین‌شده RNA با خلوص > 1.8 (نسبت جذب A260/A280)
• سازگاری با انواع نمونه و حجم‌های مختلف
• آلودگی بسیار کم به DNA یا پروتئین
• امکان پردازش چند نمونه به صورت موازی بدون کاهش کیفیت

موارد کاربرد Total RNA Extraction Kit:

این کیت برای طیف وسیعی از پژوهش‌ها مناسب است، از جمله:

• تحلیل بیان ژن با استفاده از RT-PCR
• مطالعات ترنسکریپتومیکس و RNA-Seq
• تهیه RNA برای ساخت کتابخانه‌های cDNA
• بررسی الگوهای بیانی در پاسخ به دارو یا درمان
• تحقیقات تشخیصی مولکولی

:شرایط نگهداری

⚠ این محصول باید در دمای ۲–۸ درجه سانتی‌گراد (یخچال) نگهداری شود تا فعالیت و پایداری اجزای آن حفظ شود. از انجماد مکرر اجزا خودداری کنید.

:جمع‌بندی

Total RNA Extraction Kit پارس توس با طراحی مهندسی‌شده و سازگار با استانداردهای بین‌المللی، راهکاری سریع، ایمن و قابل اعتماد برای استخراج RNA با کیفیت بالا ارائه می‌دهد. با توجه به حذف آلودگی‌ها، سرعت فرآیند، سازگاری با انواع نمونه‌ها و قیمت رقابتی، این محصول انتخابی ایده‌آل برای آزمایشگاه‌های آموزشی، تحقیقاتی و تشخیصی است.

h4>

فایل های مرتبط با کیت استخراج RNA توتال: